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产品介绍


全长转录组,是基于三代测序平台,无需打断拼接,直接获得包含5’3’UTRpolyA尾的完整转录本,从而准确分析有参考基因组物种可变剪接及融合基因等结构信息,克服无参考基因组物种转录本拼接较短、信息不完整的难题。同时还可以借助二代测序数据,进行转录本特异性表达分析,获得更加全面的注释信息。

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Sequel 测序原理

全长有参转录组:对于有参考基因组的物种,利用三代全长转录组测序获得的信息是生物体内直接存在的,比基于参考基因组预测到的转录组信息更准确,同时也可准确鉴定基因的可变剪接、融合基因、基因家族和非编码RNA等信息。同时基于全长转录组数据,可以优化基因结构,进而辅助基因组组装和注释。

全长无参转录组:由于基因组测序成本高,缺乏基因组参考信息在很大程度上限制了对物种的深入研究。通过三代全长转录组测序来构建物种Unigene库,无需进行序列组装,就可以获得该物种转录组水平的全长转录本信息,更准确的进行CDSSSR分析,为后续研究提供良好的遗传信息基础。



技术流程


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分析流程

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   三代全长有参转录组       



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   三代全长无参转录组   



技术优势

  • 无需进行转录本的拼接便可以直接获得全长转录本序列,能够更真实地反映测序物种的转录组信息;

  • 通过检测多种可变剪接形式,可发现更多的剪接位点和可变剪接事件;

  • 能够发现新的功能基因,补充基因组注释;

  • 有助于融合基因、同源基因、超家族基因或等位基因的精确分析。


送样标准


样品类型

RNA、组织样;

样品浓度

RNA浓度≥ 50 ng/ul

样品体积

> 10 ul

样品总量

总RNA用量> 10 ug

样品纯度

OD260/280≥1.8OD260/230≥1.0260nm处有正常峰值;

RNA完整性

RNARIN≥8.0;图谱基线无上抬;5S峰正常。



分析示例


全长转录组(有参_无参)测序.png



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